1. 요약
노보자임스(Novozymes)에서 개발한 유전자변형 미생물 유래 식품첨가물 리파아제(상품명 : Lipozyme 435, Lipozyme CAL B)는 2012년 최초 승인 되었다.
이후「식품위생법」제18조와 같은 법 시행령 제9조제2호(안전성 심사를 받은 후 10년이 지난 유전자변형식품 등으로서 시중에 유통되어 판매되고 있는 경우)에 따른 안전성 심사를 받기 위하여 식품의약품안전처에 안전성 심사를 신청하였다. 이에「유전자변형식품등의 안전성 심사 등에 관한 규정」에 따라 신청자가 신청한 제출 자료를 검토하였다.
안전성 심사 승인 이후 유통되어 판매되는 기간 중 새로이 발견되거나 알려진 염기서열 등 삽입 유전자의 변화, 독성·알레르기성·영양성 등 안전성에 관한 자료, 유통되어 판매되는지 여부를 확인 할 수 있는 자료, 그 밖의 변경 사항에 대한 자료가 제출되었다.
유전자변형 미생물 유래 식품첨가물 리파아제는 Candida antarctica에서 유래한 리파아제 유전자가 삽입된 Aspergillus niger를 배양하여 분비되는 효소를 분리·정제하여 생산한다. 2004년 덴마크 및 미국에서 최초로 승인되었으며 현재 134개국에서 사용이 가능하다.
효소 생산 균주는 자체 품질관리 프로세스에 의해 관리되고 매 생산 마다 효소의 규격 관리를 통해 효소 생산능력을 정기적으로 검사하며, 삽입유전자의 변화 보고는 없었다.
유전자변형 미생물 유래 식품첨가물 리파아제에 대하여 기존에 알려진 독소와 서열 유사성을 UNIPROT 데이터베이스(‘21년)를 이용하여 비교한 결과 상동성이 없는 것으로 확인되었고, 기존에 알려진 알레르겐과 아미노산 서열 유사성을 FARRP 및 WHO/ISUS 데이터베이스(’21년)를 이용하여 비교한 결과, 80개의 아미노산 절편에 걸쳐 35% 이상의 상동성을 보이는 알레르겐 서열 및 연속된 8개 이상의 아미노산과 일치하는 서열도 없음이 확인되었다.
또한, 유전자변형 미생물 유래 식품첨가물 리파아제의 최초 승인 이후 지난 10년 동안 새로이 발견되거나 알려진 안전성 관련 보고가 없어, 안전성에 문제가 없음이 확인되었다.
2. 심사경위
○ Candida antarctica에서 유래한 리파아제 유전자가 삽입된 Aspergillus niger를 배양하여 생산된 유전자변형 미생물 유래 식품첨가물 리파아제는 2012년 2월 28일 최초 승인되었다.
○ 노보자임스코리아는 식품위생법 제18조와 같은 법 시행령 제9조제2호(안전성 심사를 받은 후 10년이 지난 유전자변형식품 등으로서 시중에 유통되어 판매되고 있는 경우)에 따른 안전성 심사를 받기 위하여 2021년 3월 18일 식품의약품안전처에「유전자변형식품등의 안전성 심사 등에 관한 규정」에서 정한 관련 자료를 첨부하여 심사 신청하였다.
○ 이에 식품의약품안전처장은 본 품목을 심사규정에 따라 '유전자변형식품등 안전성 심사 위원회'(이하 ‘심사위원회’)에 심사 의뢰하였다.
3. 심사경과
4. 심사방법
○ 안전성 심사 승인 이후 유통되어 판매되는 기간 중 새로이 발견되거나 알려진 염기서열 등 삽입유전자의 변화, 독성·알레르기성 등 안전성에 관한 자료, 유통되어 판매되는지 여부를 확인할 수 있는 자료, 그 밖의 변경 사항에 대한 자료를 제출받아 검토하였다.
5. 상업화 기간 중 추가된 안전성 입증 관련 자료
5-1. 새로이 발견되거나 알려진 염기서열 등 삽입유전자의 변화
○ 효소 생산에 사용된 균주는 자체 품질관리 프로세스에 의해 매 생산 마다 효소의 규격 관리를 통해 효소 생산능력을 정기적으로 검사하며 관리되므로 염기서열의 변화는 없는 것으로 추정된다.
5-2. 독성 자료
○ UNIPROT1) 데이터베이스(’21년)를 이용하여 발현 단백질의 아미노산 서열을 대상으로 FASTA 알고리즘을 사용하여 상동성 분석을 실시한 자료2)를 검토한 결과, 상동성을 나타내는 독성물질로 알려졌거나 추정되는 단백질은 없었다.
5-3. 알레르기성 자료
○ FARRP3) 및 WHO/IUIS4) 데이터베이스(‘21년)를 이용하여 발현 단백질의 아미노산 서열을 대상으로 80개의 아미노산 절편에 걸쳐 35% 이상의 상동성5)을 보이는 알레르겐 서열을 검색한 자료2) 및 연속된 8개 이상의 아미노산과 상동성5)을 비교한 자료를 검토한 결과, 일치 하는 서열은 없었다.
5-4. 독성, 알레르기성에 관한 문헌 검토
○ NCBI6)의 검색 도구(‘21년), Google scholar7)(‘21년) 등을 이용하여 Lipozyme 435, Lipozyme CaLB L, lipase, toxin, allergen, allergy, safety의 검색어를 사용하여 리파아제와 관련된 문헌을 검색한 결과, 독성, 알레르기성 등 안전성과 관련해 새롭게 보고된 문헌은 없는 것 으로 제출되었다.
○ ’04년 덴마크 및 미국에서 승인된 이후, 세계적으로 사용되고 있는 제품으로 상업화 기간 중 안전성과 관련하여 새로운 문제가 제기된 사례는 없는 것으로 확인되었다.
5-5. 각 국의 승인현황
○ 덴마크(‘04), 미국(’04), 캐나다(‘06), 브라질(’06), 중국(‘07) 등에서 승인되었거나, 사용 가능한 식품 첨가물로 등재되어 현재 134개국에서 사용이 가능하다.
5-6. 유통현황 자료
○ ‘17～‘20년 유통현황 자료가 제출되었다.
※ 신청자의 요청에 기업 비밀의 사유로 비공개
유전자재조합에 관한 자료
○ 벡터 : pRML787
○ 삽입방법 : 원형질체법 (재조합 플라스미드 pRML787을 protoplast로 제조된 숙주세포인 A. oryzae와 반응시켜서 제조하였다.)
○ 리파아제 생산균주 개발에 이용된 벡터의 유전요소
| 구성 요소 | 크기(kb) | 유래 및 기능 |
| TAKA-amylase promoter |
1.2 | Aspergillus oryzae strain HW 325로부터 유래한 프로모터 |
| lipase | 1.2 | 리파아제 유전자 |
| terminator | 0.7 | Aspergillus niger strain BO-1으로부터 유래한 터미네이터 |
○ pRML787 플라스미드 모식도
알레르기성
○ 리파아제는 알레르기 유발물질로 알려진 바 없음을 확인하였다.
○ 리파아제는 이미 알려진 알레르겐과 상동성이 없었다.
○ 리파아제는 triglyceride로 이루어진 기질반응혼합물에 사용된다. 반응혼합물이 소수성(hydrophobic)을 나타내고, 효소가 담체에 강하게 부착되어 있다는 사실을 고려하면, 친수성(hydrophilic)을 나타내는 효소단백질이 반응 혼합물에 누출되는 경우는 극히 낮을 것으로 확인되었다.
6. 검토 결과
○ 유전자변형 미생물 유래 식품첨가물 리파아제 승인 이후 보고된 안전성과 관련된 자료를 제출받아 독성, 알레르기성, 영양성 등을 검토한 결과 안전성에 문제가 없는 것으로 확인되었다.
[참고자료 1] 제외국 승인 또는 사용 가능 국가
| Country | Industry | Limitations of use |
| Algeria | Oils & Fats | No limitations of use |
| Angola | Oils & Fats | No limitations of use |
| Armenia | Oils & Fats | No limitations of use |
| Austria | Oils & Fats | No limitations of use |
| Azerbaijan | Oils & Fats | No limitations of use |
| Bahrain | Oils & Fats | No limitations of use |
| Bangladesh | Oils & Fats | No limitations of use |
| Barbados | Oils & Fats | No limitations of use |
| Belarus | Oils & Fats | Registration by importer |
| Belgium | Oils & Fats | No limitations of use |
| Benin | Oils & Fats | No limitations of use |
| Bolivia | Oils & Fats | No limitations of use |
| Bosnia and Herzegovina | Oils & Fats | No limitations of use |
| Botswana | Oils & Fats | No limitations of use |
| Brazil | Oils & Fats | No limitations of use |
| Bulgaria | Oils & Fats | Registration by importer |
| Burkina Faso | Oils & Fats | No limitations of use |
| Burundi | Oils & Fats | No limitations of use |
| Cambodia | Oils & Fats | No limitations of use |
| Cameroon | Oils & Fats | No limitations of use |
| Canada | Oils & Fats | Modified triglycerides;only liquid enzyme approved not resin |
| Central African Republic | Oils & Fats | No limitations of use |
| Chile | Oils & Fats | No limitations of use |
| China | Oils & Fats | No limitations of use |
| Columbia | Oils & Fats | No limitations of use |
| Congo | Oils & Fats | No limitations of use |
| Costa Rica | Oils & Fats | Registration by Importer |
| Côte d Ivoire | Oils & Fats | No limitations of use |
| Croatia | Oils & Fats | No limitations of use |
| Cuba | Oils & Fats | No limitations of use |
| Cyprus | Oils & Fats | No limitations of use |
| Czech Republic | Oils & Fats | No limitations of use |
| Denmark | Oils & Fats | Interesterification of triglycerides, max. 20g/kg |
| Dominican Republic | Oils & Fats | Registration by Importer |
| Ecuador | Oils & Fats | No limitations of use |
| Egypt | Oils & Fats | No limitations of use |
| El Salvador | Oils & Fats | Registration by Importer |
| Equatorial Guinea | Oils & Fats | No limitations of use |
| Estonia | Oils & Fats | No limitations of use |
| Ethiopia | Oils & Fats | No limitations of use |
| Country | Industry | Limitations of use |
| Faroe Islands | Oils & Fats | No limitations of use |
| Finland | Oils & Fats | No limitations of use |
| France | Oils & Fats | Hydrolysis of triglycerides to allow interesterification |
| Gabon | Oils & Fats | No limitations of use |
| Georgia | Oils & Fats | No limitations of use |
| Germany | Oils & Fats | No limitations of use |
| Ghana | Oils & Fats | No limitations of use |
| Great Britain | Oils & Fats | No limitations of use |
| Guatemala | Oils & Fats | Registration by Importer |
| Guinea | Oils & Fats | No limitations of use |
| Guinea-Bissau | Oils & Fats | No limitations of use |
| Honduras | Oils & Fats | Registration by Importer |
| Hong Kong | Oils & Fats | No limitations of use |
| Hungary | Oils & Fats | No limitations of use |
| Iceland | Oils & Fats | No limitations of use |
| India | Oils & Fats | No limitations of use |
| Indonesia | Oils & Fats | No limitations of use |
| Iran | Oils & Fats | No limitations of use |
| Ireland | Oils & Fats | No limitations of use |
| Israel | Oils & Fats | Registration by Importer |
| Italy | Oils & Fats | Not for interesterification of oils |
| Jordan | Oils & Fats | No limitations of use |
| Kazakhstan | Oils & Fats | Registration by Importer |
| Kenya | Oils & Fats | No limitations of use |
| Kyrgyzstan | Oils & Fats | Registration by Importer |
| Lao People's Dem. Rep. | Oils & Fats | No limitations of use |
| Latvia | Oils & Fats | No limitations of use |
| Lebanon | Oils & Fats | No limitations of use |
| Lesotho | Oils & Fats | No limitations of use |
| Liberia | Oils & Fats | No limitations of use |
| Libyan Arab Jamahiriya | Oils & Fats | No limitations of use |
| Lithuania | Oils & Fats | No limitations of use |
| Luxembourg | Oils & Fats | No limitations of use |
| Macedonia | Oils & Fats | No limitations of use |
| Madagascar | Oils & Fats | No limitations of use |
| Malawi | Oils & Fats | No limitations of use |
| Malaysia | Oils & Fats | No limitations of use |
| Malta | Oils & Fats | No limitations of use |
| Mauritius | Oils & Fats | No limitations of use |
| Moldova | Oils & Fats | Registration by Importer |
| Morocco | Oils & Fats | Registration by Importer |
| Mozambique | Oils & Fats | No limitations of use |
| Country | Industry | Limitations of use |
| Namibia | Oils & Fats | No limitations of use |
| Nepal | Oils & Fats | No limitations of use |
| Netherlands | Oils & Fats | No limitations of use |
| Nicaragua | Oils & Fats | Registration by Importer |
| Nigeria | Oils & Fats | No limitations of use |
| Norway | Oils & Fats | No limitations of use |
| Oman | Oils & Fats | No limitations of use |
| Pakistan | Oils & Fats | No limitations of use |
| Panama | Oils & Fats | Registration by importer |
| Paraguay | Oils & Fats | No limitations of use |
| Peru | Oils & Fats | Registration by importer |
| Poland | Oils & Fats | No limitations of use |
| Portugal | Oils & Fats | not for olive oil |
| Qatar | Oils & Fats | No limitations of use |
| Romania | Oils & Fats | No limitations of use |
| Rwanda | Oils & Fats | No limitations of use |
| San Marino | Oils & Fats | same regulation as Italy |
| Saudi Arabia | Oils & Fats | Olive oil |
| Senegal | Oils & Fats | No limitations of use |
| Sierra Leone | Oils & Fats | No limitations of use |
| Singapore | Oils & Fats | No limitations of use |
| Slovakia | Oils & Fats | Registration by Importer |
| Slovenia | Oils & Fats | No limitations of use |
| Somalia | Oils & Fats | No limitations of use |
| South Africa | Oils & Fats | No limitations of use |
| South Korea | Oils & Fats | No limitations of use |
| Spain | Oils & Fats | Only for whole egg and egg yolk modification |
| Sri Lanka | Oils & Fats | No limitations of use |
| Sudan | Oils & Fats | No limitations of use |
| Suriname | Oils & Fats | No limitations of use |
| Swaziland | Oils & Fats | No limitations of use |
| Sweden | Oils & Fats | No limitations of use |
| Syrian Arab Republic | Oils & Fats | No limitations of use |
| Taiwan | Oils & Fats | Registration by Importer |
| Tanzania | Oils & Fats | Also Olive Oil extraction |
| Togo | Oils & Fats | No limitations of use |
| Trinidad and Tobago | Oils & Fats | Registration by importer |
| Tunisia | Oils & Fats | No limitations of use |
| Turkey | Oils & Fats | Registration by Importer |
| Turkmenistan | Oils & Fats | Registration by Importer |
| Uganda | Oils & Fats | No limitations of use |
| Ukraine | Oils & Fats | Registration by importer |
| Country | Industry | Limitations of use |
| United Arab Emirates | Oils & Fats | No limitations of use |
| Uruguay | Oils & Fats | For flavour enhancement |
| Uruguay | Oils & Fats | Registration by Importer |
| USA | Oils & Fats | No limitations of use |
| Uzbekistan | Oils & Fats | No limitations of use |
| Vanuatu | Oils & Fats | No limitations of use |
| Venezuela | Oils & Fats | No limitations of use |
| Yemen | Oils & Fats | No limitations of use |
| Zambia | Oils & Fats | No limitations of use |
| Zimbabwe | Oils & Fats | No limitations of use |
